判断染菌原因

• 检查发酵罐系统：仔细检查发酵罐的罐体、阀门、管道、搅拌器、密封件等部件，看是否有损坏、泄漏或腐蚀的情况。例如，阀门的密封不严可能导致外界杂菌进入发酵罐；搅拌器的轴封磨损可能使杂菌从轴封处渗入。

• 分析培养基和原料：检测培养基和原料是否受到污染，检查其储存条件和使用过程是否符合要求。例如，培养基的配制过程中是否混入了杂菌，原料是否有变质或受到污染的情况。

• 监测无菌空气系统：检查无菌空气系统的过滤器是否失效，空气的温度、湿度和压力是否符合要求。如果无菌空气带菌，会导致发酵罐染菌。

• 回顾操作过程：审查发酵过程中的操作记录，包括接种、取样、补料、设备维护等操作是否严格按照无菌操作规范进行。操作人员的失误或不规范操作可能是染菌的原因之一。




采取相应措施

种子培养期染菌：

隔离纯种菌株：从发酵罐中取出染菌样品，进行分离处理得到纯种菌株。分离方法可采用涂布培养法或稀释涂布法。

菌株鉴定：通过形态学特征、生理生化特性、分子生物学等方法对纯种菌株进行鉴定，确定其物种和属别。

***土壤污染：***清洁发酵罐中的土壤，避免菌株重新污染，可使用消毒剂或高温处理等方法。

发酵罐清洗消毒：对发酵罐内壁和设备进行***清洗消毒，杀灭潜在污染菌株，可采用高温蒸汽灭菌、紫外线照射、化学消毒剂等方法。

定期监测：在种子培养期间，定期监测发酵罐内的菌群情况，及时发现并处理异常。

引入正面菌株：在种子培养期间引入一些正面菌株，利用其竞争优势抑制有害菌的生长。

增加通风换气：合理调控发酵罐的通风换气，使空气流通，降低有害菌滋生机会。

发酵前期染菌：

若培养基中的碳、氮源含量还比较高时，终止发酵，将培养基加热至规定温度，重新进行灭菌处理后，再接入种子进行发酵。

如果染菌已造成较大危害，培养基中的碳、氮源消耗量已比较多，则可放掉部分料液，补充新鲜的培养基，重新进行灭菌处理后，再接种进行发酵。也可采取降温培养、调节 pH 值、调整补料量、补加培养基等措施进行处理。

发酵中、后期染菌：

加入适量杀菌剂或***以及正常的发酵液，以抑制杂菌的生长速度，也可采取降低培养温度、降低通风量、停止搅拌、少量补糖等其他措施进行处理。

如果发酵过程的产物代谢已达到一定水平，且产品含量达一定值，只要明确是染菌也可放罐。

对于没有提取价值的发酵液，废弃前应加热至 120℃以上、保持 30min 后才能排放。

对设备进行挽救处理：

发酵罐在染菌后重新使用前，必须在放罐后进行***清洗，空罐加热灭菌至 120℃以上、保持 30min 后才能使用，也可用甲醛熏蒸或甲醛溶液浸泡 12h 以***方法进行处理。

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